Modulation von Proliferation und Migration boviner kornealer Endothelzellen durch humanes Kammerwasser, TGF-ß2 und Ascorbinsäure

98. Jahrestagung der DOG 2000

V 242

Modulation von Proliferation und Migration boviner kornealer Endothelzellen in vitro durch humanes Kammerwasser, TGF-ß2 und Ascorbinsäure

I. Ryseck, P. Rieck

Einleitung: Die Wundheilung kornealer Endothelzellen erfolgt haupt- sächlich durch Migration benachbarter Zellen. Die Endothelzellen sind in vivo ständig in Kontakt mit Kammerwasser (KW). TGF-ß2 und Ascorbin- säure (AS) sind in hoher Konzentration im KW enthalten. Der Einfluß von humanem KW, TGF-ß2 und AS auf Proliferation und Migration boviner kornealer Endothelzellen (BCEC) in Kultur wurde untersucht.

Methoden: Proliferation: BCEC der 1.Passage wurden zu 1,5x10⁴ Zellen/Well ausgesät. Mit frischem Medium und Zusatz von humanem KW (10% und 100%), TGF-ß2 (0,1; 1 und 10 ng/ml) und AS (50, 100 und 200 µg/ml) wurden die Kulturen für 72 oder 96 h inkubiert und anschließend gezählt. Migration: Konfluente Zellkulturen der 1.Passage wurden verwen- det. Mit einem modifizierten Trepan (Æ 5,5 mm) wurde eine zentrale, zirku- äre "Wunde" gesetzt. Die Kulturen wurden mit frischem Medium, das huma- nes KW, TGF-ß2 und AS in den o. g. Konzentrationen enthielt, für 72 oder 96 h inkubiert. Zur Auswertung wurden die in den Wundbereich migrierten Zellen an 5 verschiedenen Stellen, ausgehend vom Wundrand, gezählt.

Ergebnisse: Die Proliferation der BCEC wurde durch humanes KW (unverdünntes KW: nahezu 100%; 10%iges KW: 30%) und Ascorbinsäure (ca. 90% bei AS 200 µg/ml) gehemmt. TGF-ß2 stimulierte die Proliferation bis zu einem 3fachen Wert der Kontrollen. Die Migration wurde durch humanes KW (unverdünntes KW: nahezu 100%; 10%iges KW: 30%) und TGF-ß2 (ca. 50% bei allen Konzentrationen) gehemmt. AS hatte einen stimulierenden Einfluß (20-50%) auf die Migration.

Schlußfolgerung: Noch ist unklar, welche Substanzen im KW für den pro- liferationshemmenden Einfluß auf korneale Endothelzellen verantwortlich sind. Sowohl AS als auch TGF-ß2 zeigten einen gegensätzlichen Effekt auf Proliferation und Migration kulti- vierter BCEC. Die Bedeutung dieser Beobachtungen für die Wundheilung humaner kornealer Endothelzellen in vivo ist Gegenstand weiterer Untersuchungen.

Augenklinik der Charité, Campus Virchow Klinikum, Augustenburger Platz 1, D 13353 Berlin; unterstützt durch die DFG Ri 568/3-2

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