98. Jahrestagung der DOG 2000

V 412

 Makrophagendepletion mit liposomalem Clodronat hemmt die Leukozyten-Endothel Interaktion bei Experimenteller Melanininduzierter Uveitis (EMIU)

J. Puchta, U. Pleyer, R. Reszka*, H. Baatz

Einleitung: Die Experimentelle Melanininduzierte Uveitis (EMIU) dient als Modell für eine autoimmune Iridozyklitis und Choroiditis. Die frühe Entzündungsreaktion ist durch eine gesteigerte Leukozyten-Endothel Interaktion gekennzeichnet. Um die Rolle von Makrophagen bei der Induktion von EMIU zu untersuchen, analysierten wir Veränderungen der Leukozyten-Endothel Interaktionen in Irisvenolen anästhe-sierter Ratten nach Makrophagendepletion mit liposomalem Clodronat.

Methoden: Die EMIU wurde durch intraperitoneale Injektion einer Emulsion aus 250 µg bovinen Melanosomen (BMA) in komplettem Freund Adjuvant und Pertus-sistoxin bei Lewis Ratten (n=66) induziert. Die Tiere wurden mit 2 ml Clodronat-Liposomen (DMDP-lip) an den Tagen –2; 1; 4; 6 beziehungsweise 8 nach Immuni-sierung behandelt. Kontrolltiere erhielten anstelle von DMDP-lip Leerliposomen (Kontrolle). Für die Intravitalfluoreszenzmikroskopie wurden Leukozyten intravasal mit Rhodamin 6G gefärbt. Anschließend wurden die postkapillären Irisvenolen am 8. und 10. Tag untersucht, um die Zahl der rollenden und fest am Endothel adhä-renten Leukozyten zu quantifizieren. Weitere Parameter wie Zellzahl und Protein-gehalt des Kammerwassers, TNF-a und IFN-g im Plasma und das Differentialblut-bild wurden zur Charakterisierung der Entzündungsreaktion herangezogen.

Ergebnisse: Bei makrophagendepletierten Tieren konnten spaltlampenmikros-kopisch keine entzündlichen Veränderungen des Vorderabschnittes beobachtet werden. Der prozentuale Anteil rollender Leukozyten war am 8. Tag mit 2±1.1 vs. 15.2± 1.6; 5.2± 0.5% (DMDP-lip vs. EMIU; Kontrolle, Mittelwert ± MSF, ANOVA, p<0.05) und 10. Tag mit 2.6± 0.3 vs. 14.2±1.6; 5.9±0.7% deutlich erniedrigt. Die Zahl der fest adhärenten Leukozyten nahm am 8. und 10. Tag deutlich ab: 88±13 vs. 175±18/mm2 und 129±13 vs. 372±31/mm2 (DMDP-lip vs. EMIU). Kein Unter-schied der Zahl fest am Endothel haftender Leukozyten wurde zwischen EMIU und der Kontrolle festgestellt. Eine signifikante Reduktion der Zellemigration (11±2 vs. 82±17; 100±29 Zellen/µl) und Proteinexsudation (2.7±0,3 vs. 12.5±1.7; 14.2±2.1 mg/ml) in das Kammerwasser war am 10. Tag erkennbar.

Diskussion: Die Depletion von Makrophagen vor einer Immunisierung mit BMA vermindert die Entzündungsreaktion bei EMIU. Makrophagen spielen eine ent-scheidende Rolle bei der Induktion der Leukozyten-Endothel Interaktion im Modell der EMIU, wahrscheinlich durch die Aktivierung von Entzündungszellen und der Sekretion proinflammatorischer Zytokine.

Gefördert durch: Deutsche Forschungsgemeinschaft, Grant Ba 1408/1-1

Augenklinik der Charité, Humboldt-Universität, Augustenburger Platz 1, 13353 Berlin und *Max Delbrück Centrum for Molecular Medicine (MDC), "AG Drug Targeting", D-13125 Berlin-Buch


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