Alge C., Welge-Lüßen U.

Augenklinik der Ludwig-Maximilians-Universität, München

Zielsetzung: Die altersbedingte Maculadegeneration (AMD) stellt die häufigste Erblindungsursache in der westlichen Welt dar. Pathogenetisch beruht die AMD unter anderem auf vermehrtem oxidativem Stress und der Erhöhung von verschiedenen Wachstumsfaktoren (TGF-ß, VEGF, FGF). Der Einfluß dieser Faktoren auf die Expression von Streßproteinen im retinalen Pigmentepithel (RPE) ist bis heute nicht untersucht worden. Ziel dieser Arbeit war die Untersuchung der Bildung des kleinen Hitzeschockproteins aB-Crystallin, welches bei verschiedenen degenerativen Erkrankungen im zentralen Nervensystem erhöht ist.
Material und Methode: Die Expression von aB-Crystallin im RPE von 6 normalen Spenderaugen wurde durch RT-PCR und Western-blot Verfahren untersucht. RPE Zellen von 5 verschiedenen Spendern der dritten Passage wurden mit 1.0 ng/ml TGF-ß, 200 pg/ml bFGF und 10 ng/ml VEGF für 12-72 h inkubiert. Für die Erzeugung von oxidativen Stress wurden die RPE Zellen für 30 min H²O² (2 µMol) ausgesetzt. 24 - 72 h nach Behandlung wurden die Zellen geerntet. Die Induktion von aB-Crystallin wurde auf der Protein-Ebene mit Western-blot und auf der mRNA-Ebene mit Northern-blot Verfahren quantifiziert.
Ergebnisse: RPE exprimiert sowohl in vivo als auch in vitro aB-Crystallin. TGF- ß und H²O² erhöhten die Expression von aB-Crystallin in kultivierten RPE Zellen um den Faktor 6-10x auf der mRNA Ebene, während der Effekt auf der Proteinebene deutlich schwächer ausgeprägt (2-3x) war. Die Präinkubation der RPE-Zellen mit Actinomycin verhinderte den Anstieg sowohl auf der mRNA als auch auf der Proteinebene. Die anderen Wachstumsfaktoren zeigten keinen Effekt auf die aBcrystallin Produktion.
Schlußfolgerung: In der vorliegenden Studie konnten wir erstmalig zeigen, daß aB-Crystallin in vitro im RPE durch oxidativen Streß und TGF-ß induzierbar ist. Somit könnte aB-Crystallin, welches in der Pathogenese verschiedener neurodegenerativer Erkrankungen eine wichtige Rolle spielt, auch bei der AMD einen entscheidenden Faktor der Genese darstellen.
Unterstützung: Forschungsförderung der DOG, DFG WE 2577/2-1

Copyright © Deutsche Ophthalmologische Gesellschaft, 2001. All rights reserved.

Last updated: 

Webdesign: SPALLEK.COM