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Impressum
Präparation von RPE-sheets an Schweineaugen
Gamulescu M. A., Framme C., Roider J.
Augenklinik der Universität Regensburg, Franz-Josef-Strauß-Allee 11, 93053 Regensburg
Ziel: Eine Operation bei altersabhängiger Maculadegeneration mit Extraktion der choroidalen Neovaskularisationsmembran geht meistens mit einem Verlust des retinalen Pigmentepithels (RPE) in diesem Bereich einher. Ziel der hier vorgestellten Versuche war es, eine Methode zu entwickeln, mit der zusammenhängende RPE-sheets präpariert werden können, welche sich zu einer Transplantation eignen.
Methoden: An frischen Schweinebulbi (2-4 Std. nach Enukleation) wurde nach Entfernen des Glaskörpers und der Netzhaut das RPE entweder direkt präpariert oder zunächst die Adhäsion des RPE an der Bruch`schen Membran mittels Ca/Mg-freier Lösung (Inkubationszeiten von 1 bis zu 30 Min.) gelockert. Nach Vorritzen eines ca. 3 x 3 mm großen Areals wurde das RPE durch Unterspülen mit einer subretinalen Kanüle als zusammenhängendes sheet abgehoben.
Ergebnisse: In der Histologie zeigte sich lichtmikroskopisch ein einreihiges,zusammenhängendes RPE mit gut erhaltenen Zelle. Mit zunehmender Einwirkzeit der Ca/Mg-freien Lösung konnte das RPE besser präpariert werden, jedoch zeigten sich gleichzeitig auch zunehmende Zerfallserscheinungen der Zellen und des Zellverbandes. Optimale Einwirkzeiten für die Präparation betrugen 1-5 Min. Die präparierten RPEsheets ließen sich, obschon sehr fragil, mit einem weichen Instrument gut an eine andere Stelle des Bulbus bewegen, retinale und choroidale Seite waren aufgrund eines unterschiedlichen Reflexes gut zu unterscheiden. Je peripherer am Bulbus die Präparation des RPE begonnen wurde, desto schwieriger ließ es sich abheben und desto leichter zerfaserte es.
Zusammenfassung: Es ist möglich, durch kurzzeitige Applikation von Ca/Mg-freier Spüllösung RPE als zusammenhängendes sheet zu präparieren und dieses innerhalb des Bulbus zu bewegen. Diese Methode kann für eine autologe RPE-Transplantation bei der Behandlung der altersabhängigen Maculadegeneration genutzt werde.