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Impressum
Genexpression von TNF-alpha und Interleukin-6 in Keratozyten von Patienten mit Hornhautulzerationen bei rheumatoider Arthritis
1Prada J., 2Noelle B., 1Pleyer U.
Universitäts-Augenklinik Charité1, Campus Virchow-Klinikum, Humboldt Universität zu Berlin und 2Klinik für Augenheilkunde, Christian Albrechts Universität, Kiel
Zielsetzung: Sterile Hornhautulzerationen und Keratomalazie sind
charakteristische Manifestationen der rheumatoiden Arthritis. Die zugrundeliegenden
pathophysiologischen Mechanismen sind bisher nicht bekannt, es wird jedoch
vermutet das eine immunmediierte Aktivierung von Metalloproteinasen bedeutsam
ist. Da rheumatoide Hornhautulzerationen durch eine sehr begrenzte Infiltration
mit inflammatorischen Zellen auffallen wird weiterhin angenommen das Keratozyten
aktiv an diesem Prozess beteiligt sein könnten. Aus diesem Grund
haben wir die Gen-Expression der proinflammatorischen Zytokine Tumor Nekrose
Faktor-alpha (TNF-alpha) und Interleukin-6 (IL-6) in Hornhautbiopsien
von Patienten mit Hornhautulzerationen bei rheumatoider Arthritis analysiert.
Methoden: Hornhautbiopsien von sieben Patienten mit rheumatoider
Arthritis assoziierten Hornhaut Ulzerationen und/oder Einschmelzungen
wurden in 4% Paraformaldehyd gelagert, bevor sie in Paraffin unter RNAase-freien
Bedingungen eingebettet wurden. Schnitte von 4-5 µm wurden auf Silan-beschichteten
Objektträger fixiert und mit nicht-radioaktiven in situ Hybridisierungen
unter Verwendung spezifischer Gen-Sonden für TNF-alpha und IL-6 analysiert.
Sowohl die Markierung der Gen-Sonden mit Digoxigenin als auch der darauf
folgende Nachweis von den erzielten Hybriden wurde mit Hilfe des DIG-(Markierung
und Nachweis)-Systems von Boehringer Mannheim durchgeführt.
Ergebnisse: Bei 5 der 7 analysierten Patienten konnte in den Keratozyten
im Bereich der Hornhautulzera eine ausgeprägte TNF-alpha Gen Expression
beobachtet werden. Darüber hinaus ließ sich bei allen 7 Patienten
ebenfalls eine verbreitete IL-6 Gen Expression in den Keratozyten der
analysierten Hornhautproben darstellen.
Konklusion: Die hier beschriebene Beobachtungen weisen darauf hin,
dass Hornhautstromazellen im Bereich der Ulzerationen eine positive Überregulation
der Zytokine TNF-alpha und IL-6 zeigen. Diese Befunde unterstützen
die Hypothese, dass Keratozyten durch eine verbreitete Überexpression
von den proinflammatorischen Zytokinen TNF und IL-6 die Produktion von
Metalloproteinasen modifizieren können, und damit zu kollagenolytischen
Hornhautschäden beitragen könnten.