Schweitzer D., Hammer M., Anders R.

Augenklinik der FSU Jena, Bereich Experimentelle Ophthalmologie, Jena

Ziel: Es war zu untersuchen, ob eine Unterscheidung von endogenen Fluorophoren (z.B. Stoffwechselendprodukten, prostetischen Gruppen) am lebenden Augenhintergrund erreicht werden kann.
Methode: Es wurde die Fluoreszenzlebensdauer als Grundlage der Unterscheidung von Fluorophoren gewählt. Hierzu wurde ein Laser Scanner Ophthalmoskop aufgebaut, durch das die Fluorophore des Augenhintergrundes während des Abtastens mit Laserpulsen von 300ps Dauer und einer Frequenz von 77 MHz bei einer Wellenlängen von 458nm angeregt werden. Das Fluoreszenzlicht wird in Spektralbereichen größer als 515nm in zeitkorrelierter Einzelphotonen Zähltechnik detektiert. Durch die Anwendung des Maximum Likelihood Kriteriums kann eine monoexponentielle Approximation des Abklingverhaltens bereits mit einem Fehler kleiner als 10% berechnet werden, wenn insgesamt in allen Zeitkanälen nur als 300 Photonen detektiert werden.
Ergebnisse: Am gesunden Auge wurde die Fluoreszenzlebensdauer im parapapillären Bereich im Mittel mit ca. 1.5ns und in der Papille sowie in großen Gefäßen mit ca. 5ns bestimmt. Durch die Auswertung von Histogrammen der Lebensdauer im parapapillären Gebiet wurden Peaks bei 1.38ns und 2ns sowie ein breites Maximum um ca. 3ns gefunden. die Lipofuszin (A2-E) und FAD sowie wahrscheinlich Elastin und Kollagen entsprechen.
Schlußfolgerung: Es wurde erstmalig gezeigt, daß die zeitaufgelöste Messung der Autofluoreszenz am lebenden menschlichen Augenhintergrund möglich ist. Der in vivo Nachweis von FAD (flavin adenin dinucleotid) als prostetischer Gruppe im Citratzyklus und in der oxidativen Phosphoryllierung eröffnet die Möglichkeit zur nichtinvasiven Bestimmung des Stoffwechselstatus auf zellulärem Niveau.

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