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Impressum
Einfluß von Advanced Glycation Endproducts und der Zytokine bFGF/VEGF auf die Gefäßformation von choroidalen Endothelzellen
1,2Wang Y. S., 2Friedrichs U., 2Eichler W., 2Hoffmann S., 2Wiedemann P.
2Universität Leipzig, Klinik für Augenheilkunde, Leipzig; 1Stipendiat der Alexander von Humboldt Stiftung
Ziel: Altersabhängige Makuladegeneration (AMD) mit choroidaler
Neovaskularisierung (CNV) ist eine der Hauptursachen für das Erblinden
älterer Patienten. Advanced glycation endproducts (AGE), sind möglicherweise
an der Entstehung der CNV beteiligt. Durch immunhistochemische Färbungen
konnte gezeigt werden, daß AGE verstärkt in CNV Membranen von
AMD Patienten akkumulieren. Ziel dieser Studie ist es in vitro den Einfluß
von AGE und den der Zytokine bFGF und VEGF auf die Gefäßformation
von choroidalen Endothelzellen (CEC) zu untersuchen.
Methoden: Bovine CEC wurden mit kovalent an magnetische Beads gebundenem
Lycopersicion Esculentum Agglutinin isoliert und in Endothelzellmedium
kultiviert. Die CEC wurden zwischen zwei Schichten einer Kollagen-Matrix
(Vitrogen-Gel) ausgesät und mit AGE (50-500 µg/ml), VEGF (50
ng/ml) oder bFGF (50 ng/ml) stimuliert. Nach drei Tagen wurden die Ansätze
der Gefäßformation photographiert und die Photographien digitalisiert.
Mit Hilfe des KS300 Programms wurde die Gefäßformation quantifiziert.
Ergebnis: Die Stimulation der CEC mit den Zytokinen VEGF und bFGF
führte zu einer stark erhöhten Gefäßformation. So
bewirkte die Stimulation mit bFGF eine 1,2 fache Zunahme der Gefäßlänge
(P<0,05). Dagegen hatte die AGE-Stimulation keinen Effekt auf die Gefäßformation
der CEC (P>0,05).
Diskussion: VEGF und bFGF sind starke Mediatoren der CEC Gefäßformation
in vitro. AGE haben, im Gegensatz zu den beschriebenen AGE-Effekten auf
die Hochregulierung von angiogenen Zytokinen bei retinalen endothelialen/epithelialen
Zellen, keinen direkten Effekt auf die Gefäßformation von CEC.
Um indirekte Effekte von AGE auf die CEC Gefäßformation zu
untersuchen, sind daher weitere in vitro Versuche zur Gefäßformation
von CEC mit prästimulierten retinalen Pigmentepithelzellen (Kokultur)
notwendig. Support: Deutsche Forschungsgemeinschaft, WI 880\9-1