von Eicken J., Denk P. O.

Augenheilkunde I, Universitätsaugenklinik, Tübingen

Humane Tenonsche Fibroblasten (HTF) differenzieren sich zu Myofibroblasten im Rahmen der Wundheilungsreaktion nach filtrierenden Glaukomoperationen. Im Rahmen der vorliegenden Studie untersuchten wir den Effekt von sieben verschiedenen Zytokinen auf die Expression des glattmuskulären Alpha-Aktins (a-SMA) in kultivierten HTF. HTF der zweiten Passage wurden mit den folgenden Zytokinen bei verschiedenen Konzentrationen über sechs Tage stimuliert: (PDGF-AA 0.01 - 100 ng/ml, PDGF-AB 0.01 - 100 ng/ml, PDGF-BB 0.01 - 100 ng/ml, TGF-ß1 0.0005 - 500 ng/ml, EGF 0.01 - 100 ng/ml and IL-1ß 0.001 - 10 ng/ml, b-FGF 0.01 - 100 ng/ml). Kontrollzellen wurden nur mit serumfreiem Medium inkubiert. Die Detektion und Quantifizierung des a-SMA erfolgte durch Western Blot und Immunzytologie. Im Western Blot konnte a-SMA nur nachgewiesen werden, wenn HTF mit TGF-ß1 (0.5, 5, 50 und 500 ng/ml) inkubiert worden war. Die Quantifizierung der Lumigramme zeigte, dass die Menge an a-SMA im Vergleich zu 0,5 ng/ml TGF-ß1 um den Faktor 1.45x (5 ng/ml TGF-ß1), 2.8x (50 ng/ml TGF-ß1) und 2.55x (500 ng/ml TGF-ß1) anstieg. Kein a- SMA war detektierbar nach Stimulation der Zellen mit TGF-ß1 (0.005 ng/ml and 0.0005 ng/ml), PDGF-AA, PDGF-AB, PDGF-BB, EGF, bFGF, IL-1ß oder mit serumfreiem Medium. Es kann somit gefolgert werden, dass von allen getesteten Zytokinen nur TGF-ß1 die Myofibroblastentransformation kultivierter HTF induziert. kultivierter HTF induziert.

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