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Könnten Metalloproteinasen eine Rolle spielen bei der Vernarbung der Bindehaut nach filtrierenden Glaukomeingriffen?
1Welsandt G., 2Hueber A., 1Kociok N., 2Esser J., 1Joussen A. M., 2Krieglstein G. K., 2Mietz H.,
1Universität zu Köln, Zentrum für Augenheilkunde, Abteilung für Netzhaut- und Glaskörperchirurgie (Köln)
2Universität zu Köln, Zentrum für Augenheilkunde (Köln)
Hintergrund: Die Gabe von Latanoprost verändert im Gegensatz zu der Gabe z.B. von Betablockern nicht die Zusammensetzung der Extrazellularmatrix der Bindehaut. Latanoprost bewirkt eine Hochregulation von Metalloproteinasen (MMP) und deren Inhibitoren (TIMP). Ziel dieser Untersuchungen war der mögliche Nachweis unterschiedlicher MMPs und TIMPs in Tenon Fibroblasten und die Beeinflussung deren Aktivität durch Latanoprost durch in vitro und in vivo Versuche.
Methode: Zum Nachweis von MMPs und TIMPs wurde die Immunohistochemie, für den RNA Nachweis die RT-PCR (Polymerase-Kettenreaktion) angewendet. Ferner wurden eine Western-Blot Analyse und eine Durchflusszytometrie durchgeführt. Um das Ausmaß der aktiven Form von MMPs zu bestimmen, wurden Zymographien durchgeführt. Zur Bestimmung weiterer MMP und TIMP Sub-Gruppen wurde die Real time RT-PCR eingesetzt. MMP und TIMP wurden in der Bindehaut von Kaninchen nach Latanoprost Behandlung für 1 und 4 Wochen durch Immunohistochemie nachgewiesen.
Ergebnisse: Mittels Immunohistochemie wurde der Nachweis für die Proteine MMP-3 und TIMP-2 auf Zellebene erbracht . Die RT-PCR zeigte dies auf RNA-Ebene. Diese Ergebnisse zeigen das Vorkommen von MMP-3 und TIMP-2 in humanen Tenon-Fibroblasten. Im Western-Blot wurden diese Ergebnisse bestätigt. Bei der Durchflusszytometrie konnte bei Fibroblasten nach Latanoprost-Behandlung ein Signalanstieg beobachtet werden und zwar von 0,97 auf 1,20 bei TIMP-2 und von 1,04 auf 1,24 bei MMP-3. Mittels der Zymographie-Technik konnte eine Zunahme der aktiven Form der MMP-3 nach Latanoprost-Therapie ermittelt werden. Durch die Real time RT-PCR konnten die MMPs 1, 2, 3, 7, 9 und 14 sowie die TIMPs 1 und 2 in den Tenon-Fibroblasten nachgewiesen werden. Im Tierexperiment wurde ebenfalls eine Zunahme der Immunreaktivität für MMP-3 und TIMP-2 nach Latanoprost-Behandlung gefunden.
Schlussfolgerungen: Eine ganze Reihe unterschiedlicher MMPs und TIMPs, die mit der Verstoffwechselung der Extrazellularmatrix in Verbindung gebracht werden, konnten nachgewiesen werden. Ebenso zeigte sich eine Zunahme der Aktivität nach der Gabe von Latanoprost. Der Verdacht ist daher berechtigt, daß MMPs und TIMPs eine wichtige Rolle bei Veränderungen der Bindehaut durch Antiglaukomatosa spielen könnten.