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Abstract
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Pathophysiologie der frühen PVR: Vergleichende Proteomanalyse von nativen, differenzierten und dedifferenzierten, kultivierten humanen RPE Zellen
Alge C.1,2, Suppmann S.2,3, Priglinger S.1, Neubauer A.1, Welge-Lüßen U.1, Ueffing M.2,3, Kampik A.1,2
1Augenklinik der Ludwig-Maximilians Universität, München 2Klinische Kooperationsgruppe Ophthalmogenetik, LMU München 3GSF-Forschungszentrum für Umwelt und Gesundheit, Oberschleißheim
Hintergrund: Die Dedifferenzierung von retinalen Pigmentepithelzellen (RPE) spielt eine Schlüsselrolle in der Frühphase der proliferativen Vitreoretinopathie (PVR). Ziel dieser Studie war es, durch Vergleich der Proteinexpressionsmuster von nativen, differenzierten und kultivierten, somit dedifferenzierten humanen RPE Zellen, die pathophysiologischen Vorgänge in der Frühphase der PVR besser zu verstehen.
Methode: Differenzierte, native humane RPE Zellen und kultivierte, dedifferenzierte, primäre humane RPE Zellen wurden mittels 2-D Elektrophorese analysiert. Die zellulären Proteinextrakte wurden durch isolelektrische Fokusierung unter Verwendung von immobilisierten pH Gradienten (IPG 3-10) und Elektrophorese auf Polyacrylamid Gelen (Gradient von 9-15 %) aufgetrennt. Die Visualisierung der Proteine erfolgte durch Silberfärbung. Die 2-DE Gele beider Zelltypen wurden verglichen und stark exprimierte Spots mittels MALDI-TOF (matrix assisted laser desorption ionization time of flight) Massenspektrometrie analysiert. Die resultiere