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Abstract
Abstract
Lokale Minderung von Tumor-Nekrose-Faktor Alpha bessert den Krankheitsverlauf bei der experimentellen Herpes-Keratitis
Wasmuth S.1,2, Bauer D.1, Yang Y.1, Steuhl K. P.2, Heiligenhaus A.1
1Ophtha-Lab und Augenabteilung am St. Franziskus Hospital, Münster; 2Universitätsaugenklinik Duisburg-Essen
Hintergrund: In dieser Studie wurde untersucht, ob die lokale Gabe von Antisense-Oligonukleotiden (ASON) gegen TNF-alpha den Verlauf der Herpes Simplex Keratitis (HSK) beeinflussen kann.
Methode: Milz- und Lymphknotenzellen von Herpes Simplex Virus-1 infizierten Tieren wurden mit Konzentrationen von 0,5 bis 20 µM ASON, sequenzunspezifischen Kontroll-Oligonukleotiden (KON) oder Medium inkubiert. Nach 24 Stunden wurden die Zellkulturüberstände auf ihren TNF-alpha-Gehalt im ELISA untersucht. Mit FITC-ASON wurde die Aufnahme der Oligonukleotide in Zellen im FACS analysiert. In vivo wurden FITC-ASON oder ungebundenes FITC in die Hornhaut von BALB/c Mäusen injiziert. Nach verschiedenen Zeitpunkten wurden Paraffinschnitte der behandelten Augen fluoreszenzmikroskopisch untersucht. An Tag 0 wurden die Hornhäute von BALB/c Mäuse 10hoch5 PFU HSV-1 infiziert. Eine lokale Behandlung mit ASON gegen TNF-alpha erfolgte an den Tagen -1, 1 und 4. Kontrolltiere wurden nur infiziert bzw. mit KON oder Puffer behandelt. Die Mäuse wurden täglich klinisch untersucht.
Ergebnisse: Die getesteten ASON konnten die TNF-alpha-Produktion von Milz- und Lymphknotenzellen in vitro stark reduzieren. In vivo w