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Abstract
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Migrations- und Proliferationsinhibition von ARPE Zellen unter Vitamin C
Heckelen A.1, Wöltje M.1, Kondring B.2, Jahnen-Dechent W.1, Schrage N. F.2
1IZKF Biomat, Aachen; 2Augenklinik, Universitätsklinikum Aachen
Hintergrund: Proliferation und Migration sind die wesentlichen Kennzeichen der proliferativen Vitreoretinopathie (PVR). Die Applikation von Zytostatika ist mit starken Nebenwirkungen verbunden, doch seit dem die Daunomycinstudie zur chirugischen PVR Behandlung etabliert wurde, spricht man Vitamin C natürliche proliferationshemmende Eigenschaften zu. Ein weiteres Merkmal der PVR ist die Migration von Zellen in den Glaskörperraum. Dazu wollen wir herausfinden ob Vitamin C diesen Parameter beeinflusst.
Methode: Zur Proliferationsbestimmung wurden ARPE Zellen in vitro mit ansteigenden Konzentrationen mit Vitamin C inkubiert (0,5-4mMol, pH 7,4). Die Zellproliferation wurde mittels BrdU-Einbau gemessen. Nach Austausch von Vitamin C -haltigen Zellkulturmedium (TCM) gegen normales TCM wurde die Reproliferation nach 24 Stunden gemessen. Zur Migrationsbestimmung wurden sowohl die mit 1mMol Vitamin C stimulierten ARPE Zellen (150000Z/ml) als auch unstimulierte Zellen als Negativ Kontrolle auf Zellkultureinsatze von Polycarbonatmembranen (Porengröße=8µm) ausgesät. Die Einsätze wurden in die Wells einer 24-Well Platte gestellt und für 3 Stunden zur Adhäsion inkubiert. Sowohl MCP-1(monocyte chemotactic protein-1) -haltiges Medium als auch reines Medium als Negativ Kontrolle wurde unter die Memb