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Abstract
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Dexlipotam und Formation von AGEs in RPE-Zellen
Akkoyun I., Lin J., Feng J., Jonas J. B., Hammes H. P.
Universitäts-Augenklinik, V. Med. Klinik, Universitätsklinikum Mannheim der Universität Heidelberg, Mannheim
Hintergrund: Dexlipotam wurde als Therapeutikum für die Behandlung der diabetischen Polyneuropathie und vaskulären Dysfunktion entwickelt. Es soll der Einfluss von Dexlipotam auf die advanced glycation endproducts (AGEs) in humanen retinalen Pigmentepithel (RPE)-Zellen hinsichtlich der möglichen Rolle von oxidativem Stress bei der Pathogenese der alters-assoziierten Makuladegeneration (AMD) untersucht werden.
Methode: Zellkulturen der menschlichen RPE-K1034 Zell-Linie wurden mit verschiedenen Konzentrationen von Dexlipotam (0,0, 1,0, 3,0, 10,0 mM) über 1 bzw. 6 Stunden unter Baseline-Bedingungen (5 mM Glucose), in einem Medium mit 5mM Glucose + 30 mM H2O2 über 1 h, und in einem Medium mit 25mM Glucose inkubiert. Zur Erfassung von N-carboxymethyl-lysine (CML), als Marker für die AGEs/Glycoxidation, wurden Westernblot-Analysen durchgeführt.
Ergebnisse: Sowohl unter Baseline-Bedingungen, als auch nach zusätzlicher Exposition mit 30mM H2O2 über 1 h zeigte sich eine durch CML-modifizierte Protein-Bande von ~80 kD. Die Co-Inkubation mit Dexlipotam, in steigender Konzentration bis zu 10 mM, hat diese Banden-Modifizierung nicht verändert. Unerwarteterweise wurde diese Modifikation nicht beobachtet, wenn die Zellen bei hoher Glucose-Konzentrati