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Abstract
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Expression von Plasminogen-Aktivator-Inhibitor-1 (PAI-1) mRNA in menschlichen Ziliarkörperzotten und Bestimmung von PAI-1 in humanem Kammerwasser
Meyer M. W.1, Depka M.2, Wilhelm C.2, Schroeder A.1, Czwalinna A.2, Erb C.1
1Augenklinik und 2Hämatologie der Medizinischen Hochschule Hannover
Hintergrund: Nachweis der Genexpression von PAI-1 in menschlichen Ziliarkörperzotten, quantitative Bestimmung von PAI-1 und Messung der PAI-1-Aktivität in humanem Kammerwasser sowie in Zellkulturüberständen.
Methode: Die gesamte mRNA von menschlichen Ziliarkörperzotten frisch enukleierter Augen (n=8) wurde isoliert. Mittels real-time-PCR (TaqMan® PCR) wurde die DNA-Sequenz, die für PAI-1 kodiert, amplifiziert und quantitativ gemessen. Zusätzlich bestimmten wir die Konzentration von PAI-1 Antigen (Ag) in den Zellkulturüberständen von menschlichen Ziliarkörperzotten (n=8) und in humanem Kammerwasser (n=18) mit einem ELISA (Zymutest® PAI-1 Ag). Die PAI-1-Aktivität im menschlichen Kammerwasser (n=30) wurde mit einem chromogenen Test gemessen (Coatest® PAI-1).
Ergebnisse: Mit der PCR-Methode wurde in humanen Ziliarkörperzotten die Expression von PAI-1 mRNA nachgewiesen. Abhängig vom Zeitintervall der Kultivierung variierten die PAI-1-Ag-Konzentrationen in den Zellkulturüberständen zwischen 43.1 bis 152.3 ng/ml. Die Konzentration von PAI-1-Ag im menschlichen Kammerwasser betrug 0 bis 4.56 ng/ml (im Mittel 0.46 ng/ml). Im Gegensatz dazu wurde in allen Proben eine PAI