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Abstract
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Hypoxie erhöht die Expression von CTGF und PAI-1 im retinalen Pigmentepithel
Welge-Lüßen U.1, R. Fuchshofer R.2, Kampik A.1, Lütjen-Drecoll E.2
1Augenklinik der Ludwig-Maximilians Universität, München
2Anatomisches Institut, Lehrstuhl II der Friedrich-Alexander Universität, Erlangen Nürnberg, Erlangen
Hintergrund: Die frühe altersbedingte Makuladegeneration (AMD) ist durch das Auftreten einer Aderhautatrophie und einer Verdickung der Bruch´schen Membran durch die Akkumulation von Extrazellulärer Matrix (EZM) charakterisiert. Es wird spekuliert, daß es dadurch zu einer lokalen Hypoxie im äußeren Bereich der Netzhaut und somit im RPE kommt. Ein Wachstumsfaktor mit einer starken Wirkung auf die Synthese von EZM stellt Connective Tissue Growth Faktor (CTGF) dar. Zusätzlich besitzt dieser Faktor auch eine starke angiogene Wirkung. Das Enzym Plasminogen Aktivator Inhibitor-1 (PAI-1) hemmt die Degradation der Extrazellulären Matrix (ECM). Wir haben untersucht, ob die lokale Hypoxie einen Einfluß auf die Expression von CTGF und PAI-1 in kultivierten RPE Zellen hat.
Methode: Die Expression von CTGF und PAI wurde im nativen RPE von 6 Spendern mittels PCR, Northern-Blot und Western-Blot Verfahren untersucht. Kultivierte RPE Zellen von 5 verschiedenen Spendern der dritten Passage wurden: 1. 4 - 12 Stunden unter hypoxischen Bedingungen (1% O2) inkubiert 2. 1 - 16 Stunden reoxygeniert Die Induktion von CTGF und PAI-1 wurde sowohl auf der Protein-Ebene mit Immunhistochemie und Western-blot Ver